共轭亚油酸合成相关基因在耶氏解脂酵母中异源表达及活性研究

共轭亚油酸合成相关基因在耶氏解脂酵母中异源表达及活性研究_PDF

摘要: 为了探究植物乳杆菌( Lactobacillus plantarum) 中与共轭亚油酸( CLA) 生物合成相关的 3 个基因: ( 亚) 油酸水合酶基因( mcra) 、短链脱氢酶 /氧化还原酶基因( dh) 、乙酰乙酸脱羧酶基因( dc) 在耶氏解脂酵母( Yarrowia lipolytica,Y. lipolytica) 中异源表达后能否具有活性,利用两个耶氏解脂酵母整合表达质粒( pINA 1269 和 pINA 1312) ,将 3 个基因分别导入耶氏解脂酵母营养缺陷型宿主菌Polf( Ura - ,Leu - ) 中,构建了重组菌株。在不同重组菌中添加相应的底物: 亚油酸( LA) 和 10 - 羟基 - 顺 12 - 十八碳烯酸( 10 - HOE) ,然后对反应体系进行脂肪酸检测,得到基因对应的不同产物: 10 - HOE 和 10 - 氧代 - 反 11 - 十八碳烯酸( 10 - oxo - trans 11 - octadecenoic acid) ,证明 mcra、dh、 dc 在耶氏解脂酵母中进行了异源表达并且具有活性。

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